INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOMÉDICAS

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Excelência em Ensino e Pesquisa

Disciplina: BMC0144 – Métodos de Estudo da Célula e de Tecidos

Créditos Aula: 8
Créditos Trabalho: 0
Carga Horária Total: 120 h
Tipo: Semestral
Ativação: 01/01/2012

Objetivos
Dar aos alunos conhecimentos básicos teóricos e práticos sobre as principais ferramentas de estudo da estrutura celular e tecidual.
Mostrar aos alunos a importância destes conhecimentos na sua preparação como profissional e a contribuição destas técnicas investigativas na compreensão de muitos fenômenos biológicos que consolidaram o conhecimento atual da Biomedicina.
Apresentar aos alunos a visão de que os métodos de estudo da célula vêm progredindo em muitos aspectos nos últimos anos, principalmente aqueles decorrentes da utilização de recursos de imagem e informática com aplicações práticas das mais variadas.
Preparar o aluno para compreender e analisar o universo de ferramentas metodológicas que permitem o estudo da estrutura de células e tecidos, suas aplicações e limitações

Docente(s) Responsável(eis)
26750 – Eliana Parisi Alvares
28432 – Jarbas Arruda Bauer

Programa Resumido
Este curso pretende introduzir ao profissional da área de Biomedicina os principais métodos de análise das células e tecidos: microscopia, histologia e cultura celular. Os campos de aplicação dos vários métodos morfológicos, seus respectivos embasamentos teóricos e também suas limitações serão amplamente discutidos em diferentes abordagens didáticas. Acima de tudo esta disciplina pretende apresentar aos alunos ferramentas de trabalho laboratorial e de biologia celular e tecidual experimental, proporcionando-lhes um conhecimento mais profundo e uma vivência técnica nesta área de atuação. Palestras com especialistas serão alternadas com aulas práticas, seminários e grupos de estudo.
Ao fim do curso espera-se que o aluno tenha desenvolvido a capacidade de análise crítica dos principais métodos de estudo celular e tecidual e que tenha incorporado ao seu repertório profissional as possíveis contribuições desta área do conhecimento.

Programa

  1. Ferramentas para a visualização da estrutura da célula e tecidos
    1. Microscopia de luz: princípios, métodos, aplicações e limitações
      Desenvolvimento, resolução e magnitude.
      Óptica da microscopia de luz e de sistemas de captação das imagens
    2. Microscopia de luz analítica e avançada
      Microscopia de interferência, de campo escuro, de contraste de fase e de polarização
      Microscopia de Florescência e de varredura confocal
      Microscopia invertida
    3. Microscopia eletrônica: princípios, aplicações e limitações
      Microscópios: eletrônico de transmissão, de varredura
      Metodologia básica para o estudo ultra-estrutural: fixação, ponto crítico e evaporação de ouro e carbono.
      Noções práticas sobre a operação dos microscópios eletrônicos.
      Processamento de micrografias.
      Microanálise
  2. Métodos de localização de estruturas e moléculas específicas nas células e tecidos
    1. Histologia
      Princípios, preparação das amostras, meios de embebição, microtomia e colorações.
      O Laboratório de Histologia e o mercado de trabalho.
    2. Histoquímica
      Métodos de localização de carbohidratos, proteínas, lípides e outros componentes celulares.
      Localização de carbohidratos por meio de lectinas.
    3. Imunohistoquímica
      Imunolocalização de componentes celulares e extracelulares.
    4. Hibridização in situ
      Localização de material genético.
    5. Traçadores de moléculas dentro das células
      Autoradiografia, BrdU, DeoxiG.
  3. Métodos de análise quantitativa
    1. Amostragem
    2. Morfometria
    3. Estereologia
    4. Análise de imagem automatizada e imagens digitalizadas
  4. Métodos de observação e estudo da célula/tecidos vivos
    1. Cultura de células e/ou explantes
      Princípios, limitações e vantagens.
    2. Citometria de fluxo (FACS)

Avaliação

Método
Disciplina será ministrada com o mínimo de aulas expositivas (palestras de especialistas).
As estratégias pedagógicas principais serão seminários, participações em atividades laboratoriais práticas vinculadas ao assunto de referência, discussões sobre temas da atualidade que incluem direta ou indiretamente os itens do programa.
Aulas práticas sempre que possível envolverão pequenos projetos experimentais utilizando as técnicas estudadas.
Acompanhamento de práticas experimentais diretamente relacionadas aos temas do conteúdo programático.
Critério
O aluno será avaliado por sua participação em seminários e discussões, por relatórios de atividades práticas e por uma (1) monografia a ser apresentada ao final da disciplina.
Detalhamento da avaliação:
Ao longo da disciplina o aluno será avaliado pela apresentação de seminários, pela sua participação nas discussões em grupo e pelos relatórios de atividades práticas. Ao fim do curso o aluno deverá entregar para avaliação uma monografia sobre um dos temas da disciplina, a sua escolha.
Norma de Recuperação
Será oferecida prova de recuperação (Res. COG 3583/89) nos meses de julho para as disciplinas do 1o semestre e em fevereiro para as disciplinas do 2o semestre, exigindo-se média igual ou superior a 5,0 (cinco) para aprovação.

Bibliografia

Artigos Científicos
• Bradbury S. (1989) An Introduction to the optical microscope. RMS Publications #1. Oxford University Press, Oxford.
• Bradbury S & Evennett P (1996) Contrast Techniques in Light Microscopy. RMS Hnadbook 34. Bios Scientific, Oxford.
• Ford BJ (1985) Single lens. The story of the simple microscope. Harper & Row, New York.
• Ford BJ (1998) The Earliest Views. Scientific American, 278 (4, April): 42-45.
• Journal of Microscopy (1989) vol 155, pt 3. Various articles on the History of Microscopy by Turner, Bennett, Bradbury, Bracegirdle, Hartley, Mulvey, Howie et al.
• Lacey AJ. (1989) Light microscopy in biology: a practical approach. IRL Press, Oxford
• Meek GA & Elder HY (1977) Analytical and quantitative methods in microscopy. Society for Experimental Biology Seminar Series 3. Cambridge University Press, Cambridge.
• Ploem JS & Tanke HJ (1987) Introduction to fluorescence microscopy. RMS publications #10, Oxford University Press, Oxford.
• Thomson DJ & Bradbury S. (1987) An introduction to photomicrography. RMS Publications #13. Oxford University Press, Oxford.
• Sheppard C & Shotton D (1997) Confocal Laser Scanning Microscopy. RMS Handbook 35, Bios Scientific, Oxford.
• Bracegirdle B (1987) A history of microtechnique.
• Bancroft J D & Stevens A (1982) Theory & Practice of histological technique. Churchill Livingstone,
• Brooks SA , Leathem AJC, Schumacher U (1996) Lectin Histochemistry, RMS Handbook 36. Bios Scientific, Oxford.
• Stoward PJ & Pearse AGE eds (1992) Histochemistry: Theoretical & Applied, 4th ed. Churchill Livingstone, Edinburgh.
• Stoward PJ (1973) Fixation in Histochemistry. Chapman & Hall, London.
• Polak JM & Van Noorden S (1987) An introduction to immunocytochemistry: current techniques and problems. RMS Publications #11, Oxford University Press, Oxford.
• Leitch AR et al (1994) In situ Hybridization. RMS Handbook 27. Bios Scientific, Oxford.
• Baker JRJ (1989) Autoradiography: A comprehensive overview. RMS Handbook 18, Oxford University Press, Oxford.
• Aherne WA & Dunnill MS (1982) Morphometry. Arnold, London.
• Sharma AK (1996) Morphometry: Applications to medical Sciences. Macmilan India, Delhi.
• Weibel ER (1979) Stereological methods. Vols 1 & 2. Academic Press, London Edinburgh.
• Williams MA (1977) Quantitative methods in biology (Practical methods in Electron Microscopy; 6 pt1 ed AM Glauert). North-Holland, Amsterdam

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